西伯利亚百合怎样组培快繁
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1.西伯利亚百合的鳞茎外植体
用自来水将白色西伯利亚百合的鳞茎洗40分钟,然后用刷子将泥土擦掉,洗干净。将鳞茎内的鳞叶剥掉后,除去病残,选取鳞茎基部附近的嫩鳞叶,用刀修剪,去除斑点和缺损,放入培养皿中备用。在超净工作台上用75%酒精浸泡30秒,用无菌水冲洗后再用0.1%Agcl2 _ 2浸泡8 ~ 10分钟,用无菌水冲洗5次,然后放入有滤纸的无菌培养皿中吸干水分,切成44 mm的片作为外植体。
2.西伯利亚百合组织培养的培养基和培养条件
包括在基础培养基中添加不同激素组合,每一阶段的具体培养基为:基础培养基为ms培养基或1/2MS培养基,在上述培养基中添加0.55%琼脂、3%蔗糖和pH5.8,培养温度为25-28,光照为2200~2500lx,光照为10hd-1;(1)诱导培养基:ms 2,4-d 1.5 ba 0.2;(2)增殖培养基:MS BA0.5 NAA0.2(3)生根培养基:1/2 ms NAA 0.2 mg/L
3.西伯利亚百合鳞片愈伤组织的诱导、继代培养和生根。
在超净工作台上,将灭菌后的外植体背面朝下置于诱导培养基(1)中,然后在组织培养室中避光培养一周,再在光照下培养。约20天后,鳞片表面和切口处出现淡绿色突起,1个半月后在突起处诱导出芽,基部黄绿色愈伤组织生长。经过两个半月培养,部分愈伤组织产生芽簇,其中一些继续增殖和生长。经过三个半月的培养,生长到4-5 cm以上高度并生出鳞茎的幼苗移至生根培养基上,可将诱导培养基中的其它愈伤组织部分切下,移至增殖培养基上继续诱导,继代培养产生大量愈伤组织和芽。每一个半月进行一次继代,继代芽增殖约3次,愈伤组织增殖约4次。
4.西伯利亚百合的育苗与移栽
一个半月后,移栽到生根培养基中的幼苗长出大量的根,幼苗基部的鳞茎发育到直径2 ~ 3毫米,可以在培养室中打开瓶口进行育苗。一周后,将根系上的培养基用流水清洗干净,转移到预先喷洒了0.2%百菌清溶液的基质上(沙花肥椰糠为211),在25的培养箱中培养,平均光照强度为2500lx,每天12小时。每两天浇一次水,培养15天,然后移入花盆或田地里生长。
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