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论文题白斑综合症病毒感染对中国明对虾Ras基因的影响

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今天给大家分享一篇文章:白斑综合症病毒感染对中国明对虾Ras基因的影响。引用的信息如下:

我们应该更多地了解对虾养殖,以解决对虾养殖过程中的问题,提高对虾养殖产量。

Ras是一种小分子GTP结合蛋白,参与许多细胞过程的调节,包括细胞增殖、细胞周期和细胞凋亡,在恶性肿瘤的扩散中也起重要作用。

中国明对虾(Fenneropenaeus China)是中国的传统水产养殖品种,主要分布在黄海、渤海和朝鲜半岛西海岸。

白斑综合症(WSD)影响着全世界的养虾业,每年造成巨大的经济损失。白斑综合症病毒(WSSV)是WSD的病原体。它是一种双链DNA病毒,可以感染几乎所有的商业虾种,包括中国南美白对虾、斑节对虾和日本对虾。感染WSSV的虾一般死得很快,死亡率几乎100%。

本研究克隆了中国明对虾Ras蛋白基因FcRas,并进行了基因和蛋白序列分析。感染WSSV病毒后,用Westernblot检测肝胰腺、鳃和肌肉中FcRas基因的含量,以研究WSSV对Ras基因的影响。

I. FcRas基因和蛋白质序列

FcRas基因的开放阅读框长度为564bp,编码187个氨基酸。该蛋白的预测分子量为21.33kDa,pI值为7.01。在氨基酸10 ~ 17、33 ~ 35、57 ~ 60、116 ~ 119和144 ~ 146之间,发现了5个参与GTP代谢的保守结构域。多重序列比对表明,FcRas蛋白与其他物种的Ras蛋白具有74.3%-100.0%的序列同源性,构建了脊椎动物和无脊椎动物Ras系统发育树。

2.原核表达

原核表达分析表明重组FcRas存在于细菌培养物的包涵体沉积物中。重组FcRas的分子量约为28kDa。

第三,WSSV感染实验

1.感染WSSV的中国明对虾组织中FcRasmRNA的水平。

肝胰腺中FcRasmRNA水平在感染后12h(P0.01)和24h(P0.05)显著下降。感染后48小时,显著增加(P0.05)。在鳃中,虽然转录水平明显上调,但感染组和对照组之间没有统计学显著差异(P0.05)。

2.感染WSSV病毒的中国明对虾肝胰腺和肌肉中FcRas蛋白的表达。

WSSV感染后,肝胰腺中FcRas蛋白浓度显著降低(P0.05),在感染后6、12、24和48h分别降至对照组的0.24、0.36、0.37和0.40倍。但虾肌肉中FcRas蛋白的浓度变化不明显。

摘要

结果表明,FcRas是一个保守的基因,Ras的N端序列比C端序列更保守,表明Ras的N端可能在信号转导中起重要作用。以前的研究表明,鳃和肌肉是WSSV的两个主要靶组织,而不是肝胰腺。值得注意的是,在本研究中,虽然WSSV几乎不感染肝胰腺,但作为免疫功能中的重要组织,WSSV感染对肝胰腺的基因表达水平也有显著影响。研究人员认为,WSSV可能通过下调免疫相关基因的表达来抑制肝胰腺的免疫功能。相反,肌肉中FcRas基因表达的显著上调可能是WSSV病毒复制的结果。这个假设需要进一步研究。先前在日本对虾中的研究表明,小GTP酶的表达水平受WSSV感染的影响,如Ranbp、Rho和Rab。另一项研究表明,WSSV感染后,日本对虾肝胰腺中ADP核糖基化因子(ARF)表达上调。总之,这些结果表明WSSV感染过程不仅影响Ras,还影响其他小GTP酶。然而,这些小GTP酶对虾和WSSV相互作用的具体影响还没有确定。这种表达变化是由虾对WSSV感染的防御反应还是WSSV病毒基因的复制引起的,还需要进一步研究。

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