南美白对虾“黑脚盗死” 检出一起野田村病毒盗死案
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福建省漳州市东山县犀浦镇的一个南美白对虾养殖池,为高位池,冬季大棚,面积1.8亩,平均水深1.6米,池底用纳米管充氧(见图1)。2016年11月13日一次性放苗50万株,目前规格在160 /kg左右。一日三餐,两餐喂饲料,一餐喂冷冻收获虫。
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2017年2月15日,池塘排污口发现一只死虾;
2月16日,排污口发现80只死虾,部分出现“黑脚”病;
2月17日,排污口发现200只死虾。下午3点40分,他们去养殖池塘调查。水温23.3,水质指标为pH 8.0、氨氮0.4mg/L、亚硝酸盐0.4mg/L、溶解氧7.03 mg/L,水中藻类以绿藻为主。在池塘的楼梯口,可以看到病虾在离水面5-10厘米处游动(见图2),大量被盗的死虾从池塘中间的排污口被捞出,有三分之一的被盗死虾“黑足”(见图3)。从平台上取4只无病虾(见图4)和8只病虾(见图5),接种12只虾的肝胰腺进行细菌分离培养,样品分别用95%酒精和波恩氏固定液固定进行病毒检测和组织病理学切片分析,6只死虾(见图6)用95%酒精固定进行病毒检测。
2月18日,共盗虾100公斤;
2月19日,共盗虾700公斤;
2月20日,抓虾。
结果:在28下培养24小时后,4只未感染虾的肝胰腺中未分离出细菌,8只患病虾中有5只的肝胰腺中分离出大量细菌(见图7)。通过16SrDNA序列比较,初步鉴定该菌株为哈氏弧菌。用RT-PCR方法对18份虾样品进行了病毒检测。结果表明,18份虾样品分别为白斑病毒(WSSV)、传染性皮下和造血组织坏死病毒(IMNV)、虾杆状病毒(BP)、肝胰腺细小病毒(人乳头瘤病毒)、肝肠道病毒(EHP)、桃拉病毒(TSV)和黄头病毒(YYH)。所有四只未感染的虾和八只患病的虾对CMNV呈阳性,六只死亡的虾中有两只对CMNV呈阳性(见图8)。对阳性样品的PCR扩增产物进行测序和比较,其序列与GenBank中CMNV的同源性为99.5%。组织病理学切片显示肝胰腺导管萎缩和导管间水肿(见图9),但在其他组织中未发现明显异常。
分析:1。2016年11月,福建高位池、水泥池养殖的南美白对虾出现一种被养殖户称为“黑脚盗死”的疾病,传染性明显,严重时死亡率高达60%。2014年,中国科学院黄海研究所的研究人员证实,一种新型的野田村病毒是导致对虾偷吃死亡的疑似病原体。这种病毒被命名为虾的“偷野田村病毒”。
2.本案中,未感染的虾和患病的虾都感染了盗野田村的病毒,并从部分患病虾体内分离出大量细菌。该病例是由偷野田村的病毒感染引起还是继发细菌感染,还需要进一步的流行病学调查和更多的病例来确认。
图1疾病高发区
图2病虾在池塘台阶上游泳
图3从排污口捞起的被盗死虾。
图4取自平台的四只患病虾。
图5八只病虾从池塘楼梯上游过。
图6从排污口偷吃的虾出现“黑脚”综合征。
12只活虾的细菌分离结果。
图8中18只虾的病毒检测结果。
图9肝胰管萎缩和管间水肿。
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