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弧菌是南美白对虾致病的罪魁祸首!弧菌和ORP本来就有这种关系

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文|图浙江海大唐、庄展辉、曹

在养虾的过程中,我们会遇到各种各样的问题。只有不断学习和积累养虾的相关知识和经验,才能合理解决问题。

背景

近年来,南美白对虾养殖市场惨淡,养殖率低。疾病是繁殖失败的最主要原因,弧菌是罪魁祸首。因此,控制弧菌是提高养殖成功率最关键的环节,养殖过程中的大部分管理操作实际上都是围绕着弧菌的防控来进行的。弧菌检测是弧菌防控的重要手段之一,但具有一定的滞后性和局限性。试想一下,如果我们能找到一个可以即时测量的指标,并且与弧菌有很强的相关性,那么弧菌防控将是主动的、通用的、快捷方便的。那么有没有这样的指标呢?

1.弧菌与ORP关系的探讨

水产养殖中致病性弧菌有12种,其中副溶血弧菌、溶血弧菌和霍乱弧菌在白虾养殖中较为常见。它们是兼性厌氧的,最适温度为18 ~ 37,最适温度为25 ~ 28,最适pH为6 ~ 9,呈碱性,在富含有机质的水中繁殖较快。因此,对于养殖中后期底部变质的南美白对虾的塘口来说,其底部实际上相当于一个环境适宜的大型“培养基”。

氧化还原电位(ORP)是指水溶液中所有物质的宏观氧化还原性,是反应水质的重要指标。水或沉积物中的氧化还原反应大多是细菌催化的生化反应,不同的氧化还原电位涉及不同种类的细菌。

ORP高时,好氧菌参与反应,水体或沉积物中有机物的分解产物为氨氮,进一步转化为亚硝酸盐和硝酸盐。s元素以SO42-的形式存在,Fe和Mn元素以Fe3和Mn4的形式存在,这样底部就不会发黑发臭。

ORP较低时,厌氧菌参与反应,各种物质会转化为亚硝酸盐、亚铁、锰、硫化氢、甲烷(崔月等,2017),底部呈现黑毛、恶臭现象。

微生物生存的自然环境或培养环境的ORP值是整个环境中各种氧化还原因子的综合表现,不同微生物的临界ORP值是不同的。一般来说,当ORP值在100mV以上时,好氧菌可以生长,300~ 400mV为宜,而厌氧菌一般在100mV以下的环境中生长,100~ 300mV是兼性厌氧菌的生长范围(石伟民,2017),也就是说300mV以下是弧菌和部分厌氧菌的适宜生存范围。

第二,测试验证的思想

从上面的讨论可以看出,理论上弧菌和氧化还原电位有一定的关系,但实际上并没有相应的数据支持理论和指导实践。为了验证它们之间的关系,尽可能减少误差并考虑普遍性:

(1)白虾属于底栖生物,弧菌开始在底部泥水界面繁殖;

(2)底层水相对均匀,但沉积物在不同位置和深度差异较大;

(3)受低有机质、高溶解氧、阳光等因素的影响,弧菌不适合生长,不具有代表性;

(4)底层水的指标(如pH,影响因素较大)与中上层水相比,日变化相对较小;

(5)与沉积物相比,底层水更便于采集和检测,易于推广;

(6)大棚养虾的环境相对稳定,如温度。

本次验证试验重点是大小棚的底层水。为避免交叉感染,便于应用和推广,用自制简易采水器代替采水器(如图1)。

图1用自制的简易装置采集底层水。

第三,测试结果

本实验分为大小舍,每个舍有4个顾客,每个顾客选择一个舍进行连续追踪,w

表11 #棚不同时间ORP值和菌斑数量统计结果

图21 #棚不同时间ORP值和菌斑总数趋势图。

温室客户2:黄*

表24 #棚不同时间ORP值和菌斑数量统计结果

图34 #棚内不同时间ORP值和菌斑总数趋势图。

温室客户3:戴

表31 # 31舍不同时间ORP值和空斑数统计结果

图41 #棚不同时间ORP值和菌斑总数趋势图。

温室客户4:陶兴华

表41 41 #棚中不同时间ORP值和菌斑数目的统计结果

图51 #棚不同时间ORP值和菌斑总数趋势图。

棚客1:黄军

表51 # 51舍不同时间ORP值和菌斑数量统计结果

图61 #棚不同时间ORP值和菌斑总数趋势图。

舍客2:谢*青

表623#棚不同时间ORP值和菌斑数量统计结果

图723# shed显示了不同时间的ORP值和菌斑总数的趋势。

舍客3:钱军

表73#不同时间脱落ORP值和菌斑数量统计


图8  3#棚不同时间ORP值及总菌斑数变化趋势图
小棚客户4:钱 * 育
表8  2#棚不同时间ORP值及菌斑数统计结果
图9  3#棚不同时间ORP值及总菌斑数变化趋势图
四、讨论
通过上述各趋势图可知,底层水ORP值在刚开始时高,后续逐渐走低,在4月下旬逐渐上升,然后,在5月上旬大棚ORP值均缓慢上升,而该阶段小棚却出现了先快速上升然后又回落情况。
 如下是ORP值的详细变化 

不难理解,养殖初期,有机质少,存塘量低,ORP值高,而随着养殖推进,存塘量提高,底部有机质积累增加,ORP值则逐渐降低,在4月下旬,养殖正常的塘口,日投喂普遍在20~30∕亩,亩累积投喂普遍在400~600斤,这个阶段池塘负荷最重,ORP值处于低谷;
而该阶段一方面养殖户会提高改底频率,另一方面会疏掉部分炮头虾,存塘量减少,负荷减轻,因此ORP值会出现提升的情况,但是大棚出现缓慢回升,而小棚却出现了快速回升的情况,这个原因可能是小棚水体小,对人为调控比较敏感,响应速度快,而到养殖后期随着存塘量的减少,改底、增氧等管理措施频率降低,ORP值则又会下降,ORP值的回落同样也反映了小棚小水体对外界调控的敏感性。
如上述各图所示,ORP值与总菌斑数曲线走势基本相反,近似水平轴对称,说明了底层水弧菌浓度与氧化还原电位存在比较明显的反相关关系,证实了检测ORP值对于预测弧菌变化及防控弧菌是有实际意义和应用价值的。
本次试验白虾塘口底层水ORP值基本在+300mV以下,多数在+100mV以上。大棚中底层水平均ORP值为+141.55,平均总菌斑数为42.4,小棚中为+161.2,平均总菌斑数为18,平均ORP值比大棚高了近20,而平均总菌斑数则少了24.4,而这很可能就是同一区域,2018年上海小棚鲜有发病,取得了超过9成的成功率,而大棚发病率较高,仅有5成成功率的原因之一,而造成大小棚ORP值差异的原因很可能是由于小棚增氧效率更高、环境调控相对强化。
实际上,即使知道底层水ORP值在+100~+300 mV之间,但对于预测弧菌变化仍然是不够的、不具参考性的。弧菌检测采取TCBS培养基培养法,取0.1ml,通常弧菌菌斑数在10个以内时视为安全值,达到100个时为发病临界点,而介于中间的50菌斑数则为一个拐点,称为警示值。达到50个菌斑,如果条件没有改善,弧菌达到100个菌斑数的发病临界点仅仅需要48小时。本次试验,通过数据检测和曲线比对发现,ORP值在+150mV以上时,底层水弧菌菌斑数基本上保持在警示值以下,而当ORP值达到+180mV时,弧菌菌斑数基本上保持在安全值以内,因此,为了防控弧菌,建议在养殖管理过程中或特殊养殖阶段应尽量保持ORP值不低于+150mV,最好在+180mV以上。
影响氧化还原电位高低的因素较多,如pH、碱度、硬度、盐度以及溶氧等,但是pH、碱度、硬度、盐度等这些指标在虾塘水体一般变化不大,而且碱度、硬度在较低浓度才会对ORP值有所影响,一般养虾水体碱度、硬度相对较高,其变化基本不会对ORP值有明显的影响。实际上,影响底层水ORP值的因素主要是溶氧水平和塘底有机质的积累量,也就是说提高虾塘底层水ORP值的主要方法是提高底部溶氧、减少塘底有机质的过度累积。提高溶氧不但包括提高亩功率和改进增氧方式,也包括培养优良藻相,提高光合作用产氧能力。减少塘底有机质方法多样,但是对于土塘养殖模式,最为常用的方式是改底。常见的改底产品有7种类型,但是较为常用的是氧化型(氧源氧化型和氧化剂氧化型)和生物分解型,氧化型主要是起到化学氧化的作用,快速提高ORP值,但是塘底ORP值降低的根本原因是残饵、粪便、浮游生物尸体等大分子有机质的积累,这类大分子有机质需要微生物的分解转化才能从底部移除,因此,提高底部的氧化还原电位建议生物底改与氧化底改产品交替使用。

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