关键词:异育银鲫精养池塘;底泥菌群多样性;鳃出血;疾病;初步研究
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自2012年春季以来,由CyHV-2引起的异育银鲫病毒鳃出血在江苏盐城造成了巨大的经济损失。有研究指出,感染CyHV-2的异育银鲫死亡率极高,有的池塘高达100%。由于该病毒是一种新发现的疾病,目前还没有筛选出有效的药物和疫苗。为减缓或控制异育银鲫CyHV-2病毒病的进一步蔓延,通威股份在江苏省异育银鲫主养殖区采取了一系列生态屏障建设工作,包括菌藻调控、底质改良、均衡曝气、底部排污等,取得了阶段性成果。
2015年4-7月,笔者在江苏大丰斗龙岗区对5个异育银鲫精养池塘进行了跟踪,并采集了底质。利用变性凝胶梯度电泳(PCR-DGGE)技术,对生态屏障建设塘和对照塘底泥微生物多样性进行了比较分析。观察到患病池塘中沉积物的微生物多样性显著低于未感染池塘。从微生物学角度研究发现,池塘底泥微生物的失衡可能与疾病的发生有关,如异育银鲫的鳃出血和红鳃。
一、样品收集池的基本信息
选取5个土壤鱼塘,水域面积约30-43hm2,水深1.6-1.7m,随机分为、两组。组为实验组,即三个生态屏障构建塘;组有两个对照池。培养期间,实验组实施了通渭菌藻调控、基质改良和微孔曝气三项技术。各池塘技术的应用、放鱼量和面积见表1。
第二,样品收集和PCR-DGGE分析
沉积物样品的基因组提取采用soiddna kit(OMEGA)试剂盒,操作步骤参照试剂盒说明书。由水产科技公司微生物工程实验室构建变性梯度凝胶电泳(PCR-DGGE)技术,利用BIO-radquantiyone、Biodap等生物信息学软件对电泳结果进行分析,计算不同样品的微生物多样性指数。
三、结果分析
1.池塘沉积物中微生物群落结构分析。
构建用于强化培养异育银鲫的生态屏障DGGE图1和图2显示了池塘和对照池塘的沉积物中的细菌群落多样性。通过比较DGGE条纹的相对光密度,发现:
在4-7月养殖期间,与对照池塘相比,生态屏障建设池塘沉积物样品中电泳条带数明显较多。
不同月份对照塘沉积物样品的平均条带数显著低于生态屏障建设塘。
生态屏障建设塘底泥样品的平均物种多样性指数H (Shannon指数:反应样品中的物种多样性)为3.35,而对照塘底泥样品的平均微生物群落H为2.46,生态屏障建设塘(A、B、C) H各月平均值均高于对照塘(D、E),表明生态屏障建设塘的微生物群落多样性高于对照塘。
结果表明,通渭生态屏障的建设措施有利于提高精养池塘底泥微生物区系的多样性。
2.异育银鲫发病率和死亡率分析。
作者统计了试验期间(4-7月)各试验池塘中异育银鲫的发病率和死亡率,以探讨精养池塘底泥中微生物群落结构丰度的差异对养殖效果的影响。表2显示,在建有生态屏障的三个池塘(A、B、C)中,异育银鲫的死亡率分别为5.65%、1.26%和3.90%,而在多样性和丰度较低的对照池塘(D、E)中,鱼类死亡率达到33。
3.对异育银鲫养殖过程中池塘底泥微生物群落多样性的监测,对鳃出血或细菌性疾病爆发有一定的预警作用。
注:相关研究的详细结果已发表于《水产科学》。
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