鳗鲡红鳍病的症状和防治技术
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1.病原体
嗜水气单胞菌(A.hydrophila),革兰氏阴性短杆菌,极有鞭毛,无孢子和荚膜,刚从病鱼体内分离出的病原菌往往两两相连。普通琼脂平板上的菌落呈圆形,边缘光滑,中心凸起,肉色,灰白色或略呈粉红色,有光泽,发育良好。在MacConkey培养基和SS培养基上也发育良好。可能的发育温度为5 ~ 40.5,28最适宜。能在pH 6 ~ 11生长,最适pH为7.2 ~ 7.4。它可以在0 ~ 4%的含盐量范围内生长,最适盐度为0.5%左右,含盐量为4.5%时不生长。氧化酶阳性,细胞色素氧化酶阳性,过氧化氢酶阳性,产生硫化氢,V.P .试验阳性,MR试验因菌株而异,丁二醇脱氢酶阳性,产生吲哚,硝酸盐减少,脲酶阴性,不使用丙二醇;将葡萄糖、甘露醇、麦芽糖、海藻糖、淀粉、糊精、肝糖、甘油和甘露糖发酵产生酸和气体;不要发酵木糖、山梨糖、菊粉、松三糖、adonitol、半乳糖醇和肌醇;将液化明胶、消化酪蛋白、消化莱弗氏血清和石蕊牛奶酸化、固化和胶溶;水解淀粉,磷酸酶阳性,脂肪酶阳性,卵磷脂阳性,利用柠檬酸盐,精氨酸脱氢酶阳性,鸟氨酸脱羧酶阳性,氰化钾试验阳性,P溶血(马和羊红细胞),产生毒素。
2.流行
主要通过肠道感染;多次在菌液中洗澡而无人工创伤的鳗鱼不被感染,因此认为不易发生经皮和鳃部感染。带菌鳗鱼是主要传染源;嗜水气单胞菌是一种条件致病菌,可以存在于富含有机物的水体和沉积物中。它广泛存在于鳗鱼池塘中。当水质恶化,水温变化剧烈,鱼在捕捞和处理后受伤,或者在冬末鱼的抵抗力下降,鳗鱼的肠上皮细胞退化、脱落、解体,这些解体物成为细菌的良好营养,嗜水气单胞菌大量繁殖,因此容易爆发。鳗鱼、鲤鱼、鲫鱼都容易感染。蛇、甲鱼、两栖蛙等爬行动物也易受感染;哺乳动物的小鼠、豚鼠和兔子也通过人工接种感染。
3.症状和病理变化
躯干和头部的腹皮和臀鳍呈红色,胸鳍也常呈红色。随着病情的发展,出现出血点和斑点。严重者整体发红明显,躯干背部和背鳍有时发红,但有时濒死鱼仍只是略红;病鱼不吃东西,一动不动地呆在池壁附近,有的头朝上无力地“垂直游动”,大部分几天内就死了。腹壁常有点状出血;肝脏因严重充血呈暗红色,有时可见出血点;在肝门静脉周围,常可见较大范围的肝细胞脂肪变性甚至坏死;血管周围常有大量的淋巴细胞;脾脏充血肿胀;体表出血严重时,鳃、肝、肾、脾颜色变淡,病鱼严重贫血。肾脏的病理改变往往很严重,如肾小球毛细血管充血出血,肾小球上皮细胞脱落,肾小球解体,肾小体出现蛋白样物质;肾小管上皮细胞混浊肿胀,出现滴状玻璃体变性,甚至坏死、崩解;间质严重充血。心肌纤维间严重出血。肠壁部分或全部充血,失去弹性,肠内无食物,但有带血的黄色或乳白色粘液,内含坏死的肠上皮细胞和血细胞;上皮细胞层和基底膜之间,以及固有层内有淋巴细胞和吞噬细胞浸润,毛细血管充血,固有层出血。严重者肠粘膜皱襞顶端坏死崩解,甚至完全崩解。病鱼贫血,r
鳗鲡除了红鳍病外,还有爱德华氏病、红点病和弧菌病,几种病常混合发生。因此,仅从病鱼的外观症状无法做出正确的诊断,还需要进行细菌检查、常规分离鉴定,耗时太长。可以采用快速诊断:
(1)直接荧光抗体法
荧光抗体的制备:用荧光色素标记兔嗜水气单胞菌抗血清的球蛋白(注意抗血清必须抗体效价高,无交叉反应,并经过纯化;荧光抗体制备后,还必须进行处理,消除其非特异性反应成分,并应进行测定,以确定其特异性染色强度和有无非特异性反应。配制后加入0.01%硫柳汞,可在-20下长期保存。
(2)准备病鱼组织印片,晾干,火焰固定三次。
(3)将荧光抗体滴在印迹片上,放入密闭的湿盒中,37C恒温30 ~ 60分钟,然后用pH7.2的磷酸盐缓冲液(PBS)轻轻充分洗涤,用冷风吹干。
(4)添加1滴缓冲甘油,并用盖玻片覆盖。
在荧光显微镜下,如果出现荧光,可以诊断疾病。
(2)间接荧光抗体法
兔抗鱼血清荧光抗体的制备:将鱼血清注射到家兔体内,制备兔抗鱼血清抗体,并用荧光色素标记。
在载玻片上放一圈嗜水气单胞菌菌液,让其自然扩散,用冷风吹干,在火焰上固定三次,滴入病鱼血清盖住标本,放入密闭湿盒中,37恒温30分钟,然后用0.1 mol/l PH8.0 PBS溶液轻轻冲洗三次,再依次在三缸PBS溶液中浸泡5分钟,取出后轻轻。
(3)将兔抗鱼血清荧光抗体滴在上述载玻片上盖住标本,放入密闭湿盒中,37恒温30分钟,如上浸泡洗涤,然后用蒸馏水轻轻冲洗3次,冷风吹干,加入L滴缓冲甘油,盖上载玻片。
在荧光显微镜下观察,如有荧光即可确诊。
(3)琼脂凝胶扩散试验按沉降线进行
图形不同而进行鉴别。(4)鉴别培养基
①Rimler—Shotts培养基(R—S培养基):将分离材料接种在R—S培养基上,37C培养,20小时后观察,嗜水气单胞菌发育成纯黄色菌落。水中和鱼体上存在的细菌,形成同样菌落的,只有柠檬酸细菌属(Citrobacter)及变形杆菌的一部分。
②MccoyandPilcher(1974)设计了较简单的鉴别培养基:
细菌胨10g细菌肉精10g
肝糖4g氯化钠5g
十二烷硫酸钠0.1g溴麝香草酚蓝0.1g
琼脂15g蒸馏水1L
pH6.9~7.1
培养基加热溶解并稍冷,加入分离材料,混匀后倒人培养皿,冷却凝固后,表面再覆盖一薄层2%琼脂,25C培养1天,嗜水气单胞菌形成大的黄色菌落,杀鲑气单胞菌,形成点状的黄色菌落。
5、预防措施
(1)同赤皮病的预防方法。
(2)用下述治疗用内服药,连喂3天。
6、治疗方法
(1)外用药:任意选用下列一种:
①全池遍洒呋喃唑酮,使池水成(0.2~0.5)×10-6浓度。
②全池遍洒漂白粉浓度为(1~1.2)×10-6,或漂粉精浓度为(0.5~0.6)×10-6,或优氯净浓度为(0.5~0.6)×10-6,或三氯异氰尿酸浓度为0.4×10-6。
(2)内服药:任意选用1种:
①每100千克鱼每天投喂鱼泰8号药饲3kg,分上、下午两次投喂,连喂5~7天。
②每100千克鱼每天用呋喃唑酮1~3g拌饲分两次投喂,连喂7~10天。
⑧每100千克鱼每天用磺胺-6-甲氧嘧啶或磺胺-2,6-二甲氧嘧啶15~20g拌饲分两次投喂,连喂7~10天。
④每100千克鱼每天用氯霉素或四环素1.5~2.0g拌饲分两次投喂,连喂7~10天。
防治方法
(1)每立方米水体用漂白粉1克,全池遍洒。
(2)每立方米水体用痢特灵0.3~0.5克,全池遍洒。
(3)每100千克鳗鱼用舒鳗1号药物10克拌饲投喂,每天投喂2次,连喂7天。
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