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猪炭疽病的诊断与鉴别

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由于猪的炭疽病多为慢性或隐性,临床症状不明显,急性病例少见。发生炭疽或疑似炭疽时,禁止尸检。炭疽的正确诊断非常重要,必须进行实验室检查和血清学诊断。

1.临床症状和疫情调查。临床症状的诊断价值不大。部分地区是否存在炭疽、是否存在炭疽疫源地等信息可以作为诊断参考。

2.细菌涂片和镜检的简单方法是将血液、水肿液、脾脏和病变器官组织涂于死猪耳静脉或四肢的浅表血管上,用姬姆萨或雷司令染色液或碱性亚甲蓝染色,用显微镜检查,可见到单链或短链(2-4个细菌)的竹节杆菌,两端有荚膜,即可确诊。猪局部淋巴结涂片显示炭疽杆菌的形态常不典型,呈粗细不一的扭曲状,细菌消失,可见荚膜“阴影”。3.通过在普通琼脂平板上接种新鲜的患病材料来分离和培养细菌。如果是被污染或陈旧的病害材料,可制成悬液,70加热30min,杀死无芽孢细菌后再接种培养;如果是腐烂物,可制成1:10乳剂接种小鼠,再接种患病物进行培养。根据菌落生长的特点。

如要与蜡样芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌区分,可进行7噬菌体裂解试验、荚膜形成试验、炭疽成珠试验。

4.动物感染试验:病变材料用无菌生理盐水稀释5-10倍,小鼠皮下注射0.1-0.2 ml,豚鼠皮下注射0.2-0.5 ml,家兔皮下注射1mL。接种后24 ~ 36小时(小鼠)或2 ~ 4天(豚鼠和家兔),接种动物死亡。动物尸体的器官、血液等的涂片。瑞氏染色显微镜下发现大量带有荚膜的短链炭疽杆菌。死动物注射部位可见胶质浸润和脾肿大。也可用于培养和炭疽沉淀反应检查。

5.炭疽沉淀反应(Ascoli氏反应)取几克死猪组织,切块或捣碎,加入5-10倍生理盐水,煮沸10-1-2 min,冷却后过滤,或离心沉淀,用毛细管取上清液,沿管壁缓慢加入装有炭疽沉淀血清(成品)的细玻璃管中,形成整齐的双层液面。两溶液接触面出现清晰的白色沉淀环,判定为阳性。该反应特异性高,操作简单快速,检测率高。甚至腐烂的炭疽也能产生阳性反应。县乡兽医医院(站)一般会购买一定量的沉淀血清,存放在冰箱中备用,对及时诊断本病具有现实意义。

6.酶联免疫吸附试验(ELISA)和聚合酶链反应(PCR)也可用于诊断炭疽。

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