1.疫苗选择

目前，马立克氏疫苗有两种形式：细胞依赖性疫苗(湿疫苗)和细胞非依赖性疫苗(冻干疫苗)。根据Gafova等人的研究结果，在莱航鸡的实验中，细胞附着疫苗预防马立克氏病的效果比冻干疫苗好50%左右。Gaifowa的实验鸡群共有9种不同的鸡，其中冻干疫苗免疫的一个鸡群的死亡率为17.5%，而细胞依赖疫苗的死亡率为10.4%。Addison等学者表示，用两种疫苗(冻干疫苗和湿疫苗)免疫母源抗体高的1日龄肉鸡，然后接种不同剂量的疫苗，再饲喂感染马立克氏病的3周龄鸡。结果表明，冻干疫苗免疫鸡的马立克氏病发病率高于效价较低的细胞依赖疫苗。免疫结果如表1所示。

从表1可以看出，低滴度细胞依赖疫苗的免疫效果要比高滴度冻干疫苗好得多。原因是鸡体内含有大量的母源抗体，冻干疫苗(细胞非依赖性疫苗)没有细胞保护作用，会被母源抗体中和。细胞依赖性疫苗可以保护细胞，病毒可以在细胞内繁殖，所以即使给予低滴度，也会有很好的保护作用。另外，为了克服母源抗体的影响，需要选择上一代种鸡不同血清型的疫苗接种后代鸡，或者适当增加疫苗剂量，每只鸡不超过1.3只。因此，目前我们使用液氮保存的细胞结合疫苗，即cVI-988疫苗，I型血清/resurls，效价为3000-6000 pfu/羽，疫苗免疫保护率可达97%以上。

2.确定免疫程序。

已经证明，马立克氏疫苗的效力与接种疫苗和感染强毒的间隔时间有关。所以疫苗要尽早接种，尽快产生免疫力。而一日龄接种疫苗后需要两周才能产生较强的免疫力，而且一旦野毒首先占领靶细胞，疫苗株就不能很好的增殖，导致抗体不理想。因此，早期感染野生病毒也可能引起大量马立克氏病。因此，国外研究证明，该疫苗可用于接种孵化至18天的鸡，不影响孵化率，并能在早期产生免疫力。目前在国内孵化生产中很少使用。一般在孵化后24小时内接种，在颈后中间1/3处皮下注射，剂量为0.2mL/只，即1羽。另外，为了保证免疫效果，有的人还进行二次免疫，即14日龄时皮下注射，0.2ml/疫苗。这种做法没有理论依据，目前在养鸡生产中也不现实，而且还增加了养鸡成本。

3.疫苗的正确使用

当您决定使用细胞结合疫苗时，必须仔细阅读疫苗的用法、保存和注意事项，以确保疫苗效果。

1疫苗的运输

它必须放在液氮罐中，疫苗瓶的窄颈朝上。运输过程中不允许硬碰，降低了疫苗的损坏率。

2.疫苗的保存方法

疫苗必须放在装满液氮的罐子里。液氮的液面温度是-196，必须超过疫苗桶上端10厘米以上。每天检查疫苗罐，及时补充液氮。原理是疫苗必须完全浸入液氮中。

3疫苗的稀释和使用

Marek液氮育苗的操作规程和技术要点如下：

(1)稀释疫苗前，提前一天预热稀释液，控制在22左右。

(2)疫苗稀释时，水温在270.5以内。

(3)安瓿中的疫苗应在60秒内完全解冻。

(4)接种疫苗应使用国产“16 * 40”针头。禁止用过细的针头吸入疫苗，防止细胞完整性被破坏。

(5)拆下的疫苗瓶应迅速转移。

(7)在临床生产中，为了

目前我们使用的液氮疫苗对水温、时间、稀释液温度都有严格的要求。如果超温超时，对疫苗效价影响很大。如果将疫苗从液氮中取出2分钟，再放回液氮罐中，疫苗会损失73%，疫苗必须报废。表2列出了水浴温度、时间、稀释剂温度和稀释后储存时间对疫苗效价的影响。

从表2可以看出，细胞结合疫苗的储存和使用对时间和温度有严格的要求，控制不好会直接影响疫苗的免疫效果。