氨基酸能否发生双缩脲反应?为什么 氨基酸能发生双缩脲反应吗
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氨基酸不能发生双缩脲反应。与双缩脲试剂的反应实际上是一个肽键,而氨基酸没有肽键。只有当两个以上的氨基酸凝聚在一起形成多肽时,才会形成肽键。氨基酸是含有碱性氨基和酸性羧基的有机化合物。它们是羧基碳原子上的氢原子被氨基取代后形成的化合物。
双缩脲反应是多肽和蛋白质特有的颜色反应,而不是氨基酸。含有两个氨基酪氨酸基分子的化合物与碱性溶液反应形成紫色或蓝紫色复合物。由于蛋白质分子中含有大量与双缩脲结构相似的肽键,在碱性溶液中也可与铜离子发生双缩脲反应,且颜色与蛋白质含量的关系在一定范围内符合比尔定律,与蛋白质的氨基酸组成和分子量无关,因此可用于用双缩脲法测定蛋白质含量。
双缩脲反应主要涉及肽键,受蛋白质特异性影响较小。该试剂价格便宜,易于获得,操作简便,可测定1 ~ 10mg范围内的蛋白质,适用于准确度不太高的蛋白质含量测定,蛋白质含量可测定在0.5mg左右以上。双缩脲法的缺点是准确性低,样本量大。干扰这种测定的物质包括本质上是氨基酸或多肽的缓冲液,如TrIs缓冲液,因为它们会产生正显色反应,铜离子也容易还原,有时会产生红色沉淀。
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