影响电泳的主要因素有： 1. 电泳介质的pH值 溶液的pH值决定了带电物质的解离程度，也决定了材料携带的净电荷量。对于蛋白质、氨基酸和其他类似的两性电解质，pH值离等电点越远，携带的电荷粒子越多，游动速度越快，反之亦然。因此，在分离混合物时，应选择一定的pH值，以扩大各种蛋白质所携带电荷量的差异，以便于各种蛋白质的有效分离。为了在电泳过程中保持溶液的pH恒定，必须使用缓冲溶液。 缓冲液离子强度 0 I=1/2CiZi2 (I:离子强度；Ci:离子的摩尔浓度；Zi:离子价数。 0.154M NaCl溶液的离子强度为： 我=1/2(0.1540.15412 + 12)=0.154 0.015M Na2SO4溶液的离子强度为： 我=1/2(0.015212 + 0.01522)=0.045 3.电场强度 电场强度是指每厘米的电位降(电位差或电位梯度)。电场强度越高，带电粒子运动越快。根据实验的需要，电泳可分为两种：一种是高压电泳，使用的电压在500 ~ 1000V或更高。由于电压高，电泳时间短(部分样品几分钟)，适用于氨基酸、无机离子等低分子化合物的分离，包括部分焦点电泳和序列电泳。由于电压高，产生热量，必须配备冷却装置，否则受热可引起蛋白质等物质的变性而无法分离，还可由于受热造成缓冲液中的水分过度蒸发，使支撑材料(滤纸、薄膜或凝胶等)上的离子强度增加，并造成虹吸现象(电泳池中的液体被吸进支撑中)，会影响物质的分离。另一种是常压电泳，产热低，室温在10 ~ 25下分离的蛋白质样品不受损，无需冷却装置，分离时间一般较长。 4. 电渗 在电场中液体与固体固定相的相对运动称为电渗透。电渗透是影响电泳载体运动的重要因素。最常见的例子是 -球蛋白，它从原点移动到负极。这是由电渗透引起的反向转移。产生电渗透现象的原因是，载体上往往含有可电离基团，如滤纸上含有羟基而带负电，而与滤纸接触的水溶液带正电，液体就会向负极移动。由于电渗透通常与电泳同时存在，带电粒子的运动距离也会受到电渗透的影响。如果电泳方向与电渗透方向相反，则实际电泳距离等于电泳距离加上电渗透距离。琼脂含有琼脂果胶，其中含有较多的硫酸盐，所以在琼脂电泳中电渗透现象非常明显，许多球蛋白向负极移动。当去除琼脂胶的琼脂糖用于凝胶电泳时，电渗透作用大大减弱。可以通过在支架中央放置不带电的有色染料或有色葡聚糖点来观察电渗透引起的行程距离，观察电渗透的方向和距离。 电泳技术 带电粒子在电场的作用下向与它们的电学性质相反的电极移动，这被称为电泳(EP)。电泳是一种利用带电粒子在电场中以不同速度运动来实现分离的技术。 1807年，俄罗斯莫斯科大学的费迪南德弗雷德里克罗伊斯首次发现了它。 1936年，瑞典学者Tiselius设计制造了移动界面电泳仪，分离了马血清白蛋白中的三种球蛋白，开创了电泳技术。